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[帮助]WB样品应如何装载?
[帮助]WB样品应如何装载?
大家好,我做了印迹提关于组织,样品的浓度也比较大,什么样的量是通常好多少?
谢谢,样本量与目标蛋白质的量有关。因为组织比细胞更受污染,所以样品量相对较大,通常为30-70 ug,超过100 ug。
查看这篇可能对您有帮助的帖子。>这取决于您要制造的蛋白质量。对于DAB,通常为50至100μg,对于ecl,通常为20至40μg。
但是,取决于蛋白质表达水平,目标蛋白质的绝对量至少为50 pg,ecl方法至少为20 pg。
我也使用西部等组织,蛋白质浓度确实很高。
通常50-100ug就足够了。
如果蛋白质浓度太高而负载量太低,则可以用裂解液稀释蛋白质以达到10 ul的总负载量。不要用水稀释以改变pH值。
不要超载。否则,剥离会成为一个大问题,并且看起来很糟糕。
具体而言,在测试后,如果有内部参照,则必须确认目标蛋白不存在。这可能表明样品蛋白质的量相对较低,而试图增加上样量的样品量相对不足。
当然,有许多原因导致目标蛋白不能出来的原因:)仅从负荷角度考虑。
好的,谢谢您几天前对我的预测,但是有一条。以150-160μg计算。我可以问一个问题还是可以加这么高的价格?
重要的是在实验之前分析您自己的结果,并最终弄清下部条纹并降低密度。
实际上,白平衡控制最终表明,下部试纸条不仅可以控制样品加载,还可以控制整个白平衡过程的许多部分。在实验结束时进行更多有关浓度剃刮的实验。这比后者更好。
还有某些数量不能帮助其他人回答。
重要的是要获得它并在测试条上运行它。
如果只能使用160ug,请使用160ug。
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